2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimetylo-6H-pyrymido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-

Opis produktu:

Nazwa produktu: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimetylo-6H-pirymido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one CAS NO:1234480-50-2

Synonimy:

XMD 8-92 (wolna baza);

6H-Pyrymido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one,2-[[2-etoksy-4-(4-hydroksy-1-piperydinyl)fenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimetylo-;

Właściwości chemiczne i fizyczne:

Wygląd: biały do prawie biały proszek

Wynik analityczny: ≥98,0%

Gęstość:10,3 g/cm3

Punkt wrzenia:7410,8°C przy 760 mmHg

Punktu wybuchu:4020,4°C

W vitro

XMD8-92 wykazuje największe powinowactwo do BMK1 z zmierzoną stałą dysocjacji (Kd) 80 nM, podczas gdy DCAMKL2, TNK1 i PLK4 wykazują odpowiednio 190, 890 i 600 nM.XMD8-92 jest profilowany w stosunku do wszystkich wykrywalnych kinaz w lizakach komórek HeLa za pomocą metody KiNativ i okazuje się być około 10- razy bardziej selektywny dla BMK1 z IC50 wynoszącą 1.Inne słabe cele uboczne obejmują domenę kinazy 2 RSK1 i RSK2, PIK4A i PIK4B oraz FAK.MEK5 nie jest znacząco hamowany przez XMD8-92 do 50 μM [1]XMD8-92 wykazuje wysoką selektywność dla BMK1 w badaniu in vitro związania konkurencyjnego z miejscem ATP przeciwko kinazom 402 oraz w metodzie KiNativ przeciwko wszystkim wykrywalnym kinazom w lizakach komórek HeLa.XMD8-92 blokuje aktywację BMK1 indukowaną przez EGF z IC50 240 nM i, w stężeniu do 5 μM, XMD8-92 nie ma działania hamującego na aktywację ERK1/2 przez EGF[2].

W żywo

XMD8-92 znacząco hamuje wzrost guza in vivo o 95%. Farmakokinetyka XMD8-92 jest oceniana u szczurów Sprague-Dawley, którym podano pojedynczą dawkę dożylną lub doustną.0 godzinny czas półtrwania wynoszący 26 ml/min/kg. XMD8-92 ma umiarkowaną dystrybucję tkankową o obliczonej objętości dystrybucji 3, 4 l/ kg. XMD8-92 ma wysoką biodostępność doustną z wchłanianiem 69% dawki.Po jednorazowej dawce doustnej 2 mg/kg, maksymalne stężenia w osoczu wynoszące około 500 nM obserwowane są po 30 minutach, pozostając 34 nM po 8 godzinach od podania dawki.wysokie stężenia leku w osoczu (około 10 μM po podaniu 50 mg/ kg w dawce IP) utrzymują się przez 14 dni,XMD8-92 wydaje się być dobrze tolerowany, a myszy wydawały się zdrowe bez żadnych oznak cierpienia.Leczenie XMD8-92 zarówno u myszy immunokompetentnych, jak i immunodeficientnych blokowało wzrost guzów przeszczepu płuc i szyjki macicy., odpowiednio o 95%. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinPonadto nokaut BMK1 u myszy prowadzi do całkowitego i nieodwracalnego usunięcia białka BMK1,leczenie XMD8-92 u myszy hamuje jedynie aktywność BMK1Po drugie, obserwowana niestabilność naczyniowa u myszy KO z BMK1 może być spowodowana brakiem domeny C-terminalnej nie- kinazy BMK1.który jest nadal obecny podczas leczenia zwierząt XMD8-92 [2].

Badanie kinazy

Profilizowanie KiNativ XMD8-92 odbywa się zarówno z ATP, jak i ADP acylfosforan- desthiobiotyną z następującymi modyfikacjami.Lyzaty komórkowe HeLa (5 mg/ml białka całkowitego) inkubacji w obecności XMD8-92 w temperaturze 50 μM, 10 μM, 2 μM, 0,8 μM i 0 μM przez 15 minut przed dodaniem sondy z acylfosfatem ATP lub ADP (koncentracja sondy końcowej 5 μM).Reakcje sondy trwały 10 minut, a reakcja została zatrzymana przez dodanie mocznika i przetworzona do analizy SM.. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesTa lista docelowa jest generowana i weryfikowana poprzez uprzednią wyczerpującą analizę lizatów HeLa.Do czterech charakterystycznych jonów fragmentów dla każdego konjugatu proby peptydowej kinazy wykorzystuje się do ekstrakcji sygnałów dla każdej kinazy, a porównanie leczonych inhibitorem z kontrolnymi (nieleczonymi) lizatami pozwala na precyzyjne określenie procentowego poziomu inhibicji w każdym punkcie.W trakcie przygotowania jest rękopis opisujący szczegóły tego ukierunkowanego podejścia do spektrometrii masy [1].

Admin zwierząt

Myszy[1] Komórki 5×105 HeLa są resuspensowane w DMEM i wstrzykiwane podskórnie w prawy bok 6-tygodniowych myszy Nod/Scid (dzień 0).Myszy zostały losowo podzielone na 2 grupy (6 zwierząt)., XMD8-92, 1-28 dnia, i 18 zwierząt kontrolnych).Grupa kontrolna otrzymuje codzienne wstrzyknięcia roztworu nośnego w postaci kontroli.W dniu 7 grupa kontrolna jest randomizowana w 2 grupy (6 zwierząt, XMD8-92, 7-28 dzień i 12 zwierząt, kontrolny).pozostałą grupę kontrolną losowo podzielimy na 2 grupy (6 zwierząt).W grupie XMD8-92 (7-28 dni) i XMD8-92 (14-28 dni) leczenie XMD8-92 rozpoczyna się odpowiednio w dniu 7 i dniu 14.Wielkość guza jest mierzona za pomocą zacisków, a objętość guza jest określona[1].

Odnośniki:

[1] Yang Q, et al. Farmakologiczne zahamowanie BMK1 hamuje wzrost guza za pomocą białka białaczki promyelocytowej.

[2] Yang Q, et al. Celując na trasę kinazy BMK1 MAP w terapii nowotworowej.

[3] Umapatia G, it al. Kinaza ALK stymuluje kinazę ERK5 w celu promowania ekspresji onkogenu MYCN w neuroblastomie. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

Jeśli jesteś zainteresowany naszymi produktami lub masz jakiekolwiek pytania, nie wahaj się skontaktować z nami!

Produkty objęte patentem są oferowane wyłącznie w celach badawczo-rozwojowych.